> Блог > Новини галузі

Чому культура клітин спочатку лізує еритроцити?

2022-12-23

Основний вступ
Лізат еритроцитів є одним з найбільш простих і легких методів видалення еритроцитів, тобто розщеплення еритроцитів лізатом, який не пошкоджує ядерні клітини і може повністю видалити еритроцити. Розщеплення лізату — це м’який метод видалення червоних кров’яних тілець, який в основному використовується для відділення та очищення тканинних клітин, диспергованих ферментним перетравленням, відділення та очищення лімфоцитів і видалення червоних кров’яних тілець в експериментах тканинних білків і нуклеїнів. кислотна екстракція. Клітини тканини, отримані лізатом еритроцитів, не містять еритроцитів і можуть бути використані для первинної культури, злиття клітин, проточної цитометрії, розділення та екстракції нуклеїнової кислоти та білка тощо.

Інструкція із застосування
Зразок клітин тканини
1. Свіжі тканини перетравлювали підшлунковою залозою/ферментом або колагеназою та диспергували в одноклітинну суспензію, а супернатант видаляли центрифугуванням.

2. Візьміть лізат ELS з холодильника при 4°C, додайте лізат ELS до клітинного осаду у співвідношенні 1:3-5 (додайте 3-5 мл лізату до 1 мл ущільненої клітини), обережно продуйте та перемішайте.

3. Центрифугуйте при 800-1000 об/хв протягом 5-8 хвилин і видаліть верхню червону прозору рідину.

4. Частину осаду збирали і центрифугували з розчином Хенка або безсироватковим культуральним розчином 2-3 рази.

5, якщо крекінг не завершено/завершено, можна повторити кроки 2 і 3.

6. Ресуспензія клітин для подальших експериментів; Якщо екстрагується РНК, найкраще робити це в розчині, приготованому на етапі 4, з використанням води DEPC

Еритроцити мають дуже короткий життєвий цикл, лише 120 днів, але вони дуже швидко відтворюють кров, і в цьому випадку вони особливо здатні до поділу клітин, і вони є клітинами, які найшвидше діляться з усіх, тому ця клітина дуже цінна, тому це дуже корисно для культури клітин. Це дуже просто, у ньому немає жодних органел, лише клітинні мембрани та білки.

Попередній:Які функції набору ELISA?

Далі:Вимоги до реагентів і базове представлення концентрації розчину.